6 طرق اكتشاف فيروس كورونا الجديد, كيف يكتشفون الفيروس?
1. طريقة مضان PCR
تشير طريقة PCR إلى تفاعل البلمرة المتسلسل, والتي يمكن أن تزيد بشكل كبير من كمية التتبع من الحمض النووي. عند استخدامها لاكتشاف فيروس كورونا الجديد, لأن فيروس كورونا الجديد هو فيروس الحمض النووي الريبي, فمن الضروري عكس نسخ الحمض النووي الريبي الفيروسي إلى الحمض النووي قبل إجراء الكشف عن تفاعل البوليميراز المتسلسل.
مبدأ الكشف عن PCR الفلورسنت هو أنه مع استمرار PCR, تستمر منتجات التفاعل في التراكم, وتزداد أيضًا كثافة إشارة التألق بشكل متناسب. أخيراً, تتم مراقبة التغير في كمية المنتج من خلال التغير في شدة التألق, وبالتالي الحصول على منحنى تضخيم مضان.
وهذه هي الطريقة الأكثر استخدامًا حاليًا للكشف عن الحمض النووي لفيروس كورونا الجديد. لكن, العوامل التالية قد تسبب أخطاء في نتائج الاختبار:
التخزين غير السليم أو الفشل في تقديمه للاختبار: تتحلل فيروسات الحمض النووي الريبوزي (RNA) بسهولة. وبالتالي, بعد الحصول على عينات المرضى, ويجب تخزينها بطريقة موحدة واختبارها في أسرع وقت ممكن. خلاف ذلك, قد تكون نتيجة الاختبار غير دقيقة.
تفسير النتائج خاطئ: يتم اختيار منتجات الاختبار المعتمدة حاليًا بناءً على إطار القراءة المفتوح 1أ/ب, بروتين الغلاف وبروتين القفيصة النووية في جينوم فيروس كورونا الجديد. لكن, تختلف بادئات الكشف وتصميمات المسبار للمنتجات المختلفة, وهناك اختلافات في اكتشاف وتفسير القطاعات ذات الهدف الواحد, قطاعات ثنائية الهدف, وثلاثة قطاعات مستهدفة. وبالتالي, إذا لم يتم تنفيذ التفسير بشكل صارم وفقًا للتعليمات المختلفة, فقد يؤدي إلى حكم خاطئ على النتيجة.
2. الجمع بين التحقيق ترسيخ طريقة تسلسل البلمرة
يهدف هذا النوع من الكشف بشكل أساسي إلى استخدام أداة خاصة للكشف عن تسلسل الجينات الذي تحمله كرات الحمض النووي النانوية على شريحة التسلسل.
يتمتع هذا النوع من الكشف بحساسية عالية وليس من السهل تفويت التشخيص, ولكن النتائج تتأثر أيضًا بسهولة بالعديد من العوامل, مشتمل:
لم يتم اختبار العينات في الوقت المناسب: مثل طريقة PCR الفلورسنت, قد تكون النتائج غير دقيقة إذا لم يتم تخزينها واختبارها في أسرع وقت ممكن.
درجة حرارة الغرفة في موقع الاختبار مرتفعة جدًا: سيؤثر هذا أيضًا على دقة نتائج الاختبار. قد تؤثر أيضًا أدوات ومجموعات الاختبار المختلفة على النتائج.
3. طريقة رقاقة تضخيم درجة الحرارة الثابتة
يعد اكتشاف رقاقة الجينات إحدى طرق التشخيص الفيروسي التقليدية. مبدأ الكشف هو طريقة كشف تم تطويرها بناءً على خصائص الارتباط التكميلية للأحماض النووية, والتي يمكن استخدامها لقياس نوعي أو كمي للأحماض النووية الموجودة في الكائنات الحية. مقارنة مع PCR, تتمتع شريحة الجينات بمعدل دقة أعلى ووقت أقصر, ولكن الثمن هو أكثر تكلفة, وإنتاجية الكشف (كمية البيانات التي يمكن توليدها لكل وحدة زمنية) أقل نسبيا.
يمكن لشريحة منظم الحرارة المعتمدة هذه المرة اكتشاف ستة فيروسات تنفسية بما في ذلك فيروس كورونا الجديد. ويمكن الحصول على النتائج داخل 1.5 ساعات,
مقارنة مع PCR, تتمتع شريحة الجينات بمعدل دقة أعلى ووقت أقصر, ولكن الثمن هو أكثر تكلفة, وإنتاجية الكشف (كمية البيانات التي يمكن توليدها لكل وحدة زمنية) أقل نسبيا.
4. الكشف عن الأجسام المضادة للفيروس
تستخدم كواشف كشف الأجسام المضادة للكشف عن الأجسام المضادة IgM أو IgG التي ينتجها جسم الإنسان بعد دخول الفيروس إلى جسم الإنسان. تظهر الأجسام المضادة IgM مبكرًا وتظهر الأجسام المضادة IgG لاحقًا.
تستخدم الكواشف الخمسة الجديدة للكشف عن الأجسام المضادة لفيروس كورونا والتي تمت الموافقة عليها طريقة الذهب الغروية وطريقة التألق الكيميائي للجسيمات المغناطيسية على التوالي.
5. طريقة الذهب الغروية
تستخدم طريقة الذهب الغروية ورق اختبار الذهب الغروي للاختبار, وهي ورقة الاختبار السريعة التي يشار إليها غالبًا في الوقت الحاضر.
يتم وضع علامة خاصة على هذا النوع من ورق الاختبار وبه ثقوب لتقطير عينة المصل الخاصة بالممتحن. هناك 2 خطوط على ورقة اختبار الذهب الغروية, أحدهما يسمى خط الاختبار والآخر يسمى خط مراقبة الجودة. إذا كان كلا الخطين ملونين, يعني إيجابي; يتم تلوين خط مراقبة الجودة فقط, وهو ما يعني السلبية; باستثناء هاتين الحالتين نتيجة غير صالحة.
عادة ما يستغرق هذا النوع من التفتيش حوالي 10 إلى 15 دقائق للحصول على نتيجة الاختبار.
طريقة الكشف هذه مريحة للغاية, والنتيجة سريعة جدًا. لكن العيب الرئيسي هو أن إنتاجية الكشف منخفضة وأن هناك معدلًا معينًا لسوء التقدير (تتأثر بشكل رئيسي بجودة الأجسام المضادة).
علاوة على ذلك, الجسم المضاد الجديد لفيروس كورونا الذي تم اكتشافه بواسطة طريقة الذهب الغروية هو الجسم المضاد IgM. وقت إنتاج IgM متأخر عن وقت تكاثر الفيروس, وبالتالي فإن نافذة وقت الكشف أضيق من الكشف عن الحمض النووي.
6. طريقة التألق الكيميائي للجسيمات المغناطيسية
اللمعان الكيميائي هو اختبار مناعي حساس للغاية, ويمكن تحديد جميع المواد المستضدية بهذه الطريقة.
تعتمد طريقة التألق الكيميائي للجسيمات المغناطيسية على اكتشاف التألق الكيميائي, إضافة الجسيمات النانوية المغناطيسية, بحيث يتمتع الكشف بحساسية أعلى وسرعة كشف أسرع.
لكن, تتميز طريقة التألق الكيميائي للجسيمات المغناطيسية بانتقائية ضعيفة وسوف تستجيب لسلسلة من المركبات بدلاً من مركب معين. وبالتالي, الدقة غير كافية نسبيا. علاوة على ذلك, البيئة لها تأثير كبير نسبيا على الكشف, والتي يمكن أن تؤدي بسهولة إلى الأخطاء.
