नए कोरोना वायरस निमोनिया के लिए प्रयोगशाला परीक्षण तकनीकों के लिए एक गाइड

नए कोरोना वायरस निमोनिया के लिए प्रयोगशाला परीक्षण तकनीकों के लिए एक गाइड
फरवरी को 21, राष्ट्रीय स्वास्थ्य आयोग ने एक नया कोरोनोवायरस निमोनिया रोकथाम और नियंत्रण योजना जारी की (पांचवें संस्करण), और एक अनुलग्नक के रूप में, एक नया कोरोनोवायरस संक्रमण निमोनिया प्रयोगशाला परीक्षण तकनीकी दिशानिर्देश जारी किया (पांचवें संस्करण).

नए कोरोना वायरस निमोनिया के लिए प्रयोगशाला परीक्षण तकनीकों के लिए एक गाइड

नए कोरोनोवायरस निमोनिया के प्रयोगशाला परीक्षण करने के लिए सभी स्तरों पर रोग नियंत्रण विभागों और अन्य संबंधित संस्थानों को मार्गदर्शन करने के लिए, यह तकनीकी मार्गदर्शिका विशेष रूप से तैयार की गई है.
1. नमूना संग्रह और प्रसंस्करण
1. नासॉफिरिन्जियल स्वाब: नमूना एकत्र किए जाने वाले व्यक्ति के सिर को धीरे से सहारा देता है, एक हाथ में स्वाब रखता है, स्वाब नाक से जुड़ा होता है, और धीरे-धीरे निचली नासिका नलिका के निचले भाग के साथ-साथ पीछे की ओर गहरा होता जाता है. आघात से रक्तस्राव से बचने के लिए भयंकर. जब स्वाब की नोक नासॉफिरिन्जियल गुहा की पिछली दीवार तक पहुंचती है, इसे एक सप्ताह तक धीरे-धीरे घुमाएं (पलटा खाँसी के मामले में, इसे कुछ समय तक रहना चाहिए), फिर धीरे-धीरे स्वाब को बाहर निकालें, और स्वाब हेड को संरक्षण समाधान में डुबो दें 2 को 3 वायरस का एमएल (आइसोटोनिक सेलाइन घोल का उपयोग भी उपलब्ध है, टिशू कल्चर समाधान या फॉस्फेट बफर समाधान), पूँछ त्यागें, और टोपी को कस लें.
2. ग्रसनी झाड़ू: एकत्रित व्यक्ति सबसे पहले फिजियोलॉजिकल सेलाइन से गरारे करता है, नमूना लेने वाला व्यक्ति स्वाब को गीला करने के लिए स्टेराइल सामान्य सेलाइन में डालता है (एंटीबायोटिक दवाओं से होने वाली एलर्जी से बचने के लिए स्वाब को वायरस संरक्षण समाधान में डालना मना है), एकत्रित व्यक्ति का सिर थोड़ा ऊपर की ओर झुका हुआ, मुँह चौड़ा हो गया, साथ “एएच” आवाज़, दोनों तरफ ग्रसनी टॉन्सिल को उजागर करना, जीभ के आधार पर स्वाब, और विषय के दोनों किनारों पर ग्रसनी टॉन्सिल को कम से कम थोड़ा आगे और पीछे से पोंछना 3 टाइम्स, और फिर कम से कम 3 ग्रसनी की पिछली दीवार पर दूसरा, स्वाब हेड को एक ट्यूब में डुबोएं 2 को 3 वायरस संरक्षण समाधान का एमएल (आइसोटोनिक खारा समाधान, टिशू कल्चर समाधान या फॉस्फेट बफर समाधान का भी उपयोग किया जा सकता है), पूँछ त्यागें, और टोपी को कस लें. ग्रसनी स्वाब को भी नासॉफिरिन्जियल स्वाब के समान ट्यूब में रखा जा सकता है. 3. नासॉफिरिन्जियल अर्क या श्वसन पथ अर्क: नासॉफरीनक्स से बलगम या श्वासनली से वायुमार्ग स्राव को निकालने के लिए एक नकारात्मक दबाव पंप से जुड़े कलेक्टर का उपयोग करें. कलेक्टर सिर को नाक गुहा या श्वासनली में डालें, नकारात्मक दबाव चालू करें, कलेक्टर सिर को घुमाएं और धीरे-धीरे बाहर निकलें, निकाले गए बलगम को इकट्ठा करें, और कलेक्टर को 3 मिलीलीटर सैम्पलिंग लिक्विड से एक बार धो लें (आप 50 मिलीलीटर सिरिंज वैकल्पिक कलेक्टर से कनेक्ट करने के लिए बाल चिकित्सा कैथेटर का भी उपयोग कर सकते हैं).
4. गहरा थूक: गहरी खांसी के बाद रोगी को खांसी वाले बलगम को 50 मिलीलीटर स्क्रू प्लास्टिक ट्यूब में 3 मिलीलीटर नमूना समाधान के साथ इकट्ठा करना होता है।. यदि नमूना समाधान में बलगम एकत्र नहीं किया जाता है, परीक्षण से पहले 2 ~ 3 मिलीलीटर नमूना समाधान जोड़ें या समान मात्रा में थूक पाचन समाधान जोड़ें.
थूक पाचन द्रव भंडारण समाधान सूत्र:
उपयोग से पहले, स्टॉक समाधान को पतला करें 100 विआयनीकृत पानी के साथ एमएल. फॉस्फेट बफर युक्त 1 g/L प्रोटीनेज़ K को समान मात्रा में थूक के साथ भी तरलीकृत किया जा सकता है.
5. ब्रोन्कियल लवेज द्रव: कलेक्टर सिर को श्वासनली में डालें (लगभग 30 सेमी गहरा) नासिका छिद्र या श्वासनली सॉकेट से, 5 मिलीलीटर सलाइन इंजेक्ट करें, नकारात्मक दबाव चालू करें, कलेक्टर सिर को घुमाएँ और धीरे-धीरे वापस ले लें. निकाले गए बलगम को इकट्ठा करें और नमूना तरल के साथ कलेक्टर को एक बार कुल्ला करें (आप संग्रह को बदलने के लिए 50 मिलीलीटर सिरिंज से कनेक्ट करने के लिए बाल चिकित्सा कैथेटर का भी उपयोग कर सकते हैं).
6. वायुकोशीय धुलाई द्रव: स्थानीय संज्ञाहरण के बाद, फ़ाइबरऑप्टिक ब्रोंकोस्कोप को ग्रसनी के माध्यम से मुंह या नाक के माध्यम से डालें और इसे दाएं मध्य लोब या बाएं फेफड़े की जीभ खंड की शाखा में डालें, और टिप को ब्रोन्कियल शाखा के उद्घाटन में फिट करें, और धीरे-धीरे श्वासनली बायोप्सी छेद नमक पानी के माध्यम से नसबंदी फिजियोलॉजी जोड़ें, 30-50हर बार एमएल, कुल मात्रा 100-250 मि.ली. है, 300ml से अधिक नहीं होना चाहिए.
7. मलीय नमूने: नमूना प्रसंस्करण समाधान का 1 मिलीलीटर लें, सोयाबीन के नमूने का आकार लें और इसे ट्यूब में डालें, इसे धीरे से चूसें 3-5 टाइम्स, इसे कमरे के तापमान पर खड़े रहने दें 10 मिनट, 8000rpm पर सेंट्रीफ्यूज 5 मिनट, और पता लगाने के लिए सतह पर तैरनेवाला चूसें.
मल नमूना उपचार समाधान स्वयं तैयार किया जा सकता है: 1.211 जी ट्रिस, 8.5 जी सोडियम क्लोराइड, 1.1 जी निर्जल कैल्शियम क्लोराइड या 1.47 जी कैल्शियम क्लोराइड जिसमें क्रिस्टल जल होता है, में घुल गया 800 एमएल विआयनीकृत पानी, और pH पर समायोजित किया गया 7.5 सांद्र हाइड्रोक्लोरिक एसिड के साथ , विआयनीकृत पानी से 1000 मि.ली. तक बनाएं.
HANK'S घोल या अन्य आइसोटोनिक सेलाइन घोल का उपयोग करके मल के नमूनों को घोलकर भी मल निलंबन तैयार किया जा सकता है, टिशू कल्चर समाधान या फॉस्फेट बफर. यदि रोगी को दस्त के लक्षण हों, छुट्टी 3 को 5 मल के नमूने का एमएल, धीरे से पिपेट करें और मिलाएँ, पर अपकेंद्रित्र 8000 आरपीएम के लिए 5 मिनट, और उपयोग के लिए सतह पर तैरनेवाला बनाएं.
8. गुदा झाड़ू: धीरे से एक बाँझ कपास झाड़ू को गुदा में 3 ~ 5 सेमी डालें, फिर धीरे से घुमाएं और इसे बाहर खींचें, इसे तुरंत 15 मिलीलीटर बाहरी स्क्रू कैप सैंपलिंग ट्यूब में डालें जिसमें 3 ~ 5 मिलीलीटर वायरस संरक्षण समाधान हो, पूँछ त्यागें, और ट्यूब कवर को कस लें.
9. रक्त के नमूने: 5 मिलीलीटर रक्त नमूने एकत्र करने के लिए EDTA एंटीकोआगुलेंट युक्त वैक्यूम रक्त वाहिकाओं का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है. चयनित न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण अभिकर्मक के प्रकार के अनुसार संपूर्ण रक्त या प्लाज्मा के साथ न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण का निर्धारण करें. प्लाज्मा को अलग करने के लिए, पूरे रक्त को 1500-2000rpm पर सेंट्रीफ्यूज करें 10 मिनट और सतह पर तैरनेवाला को एक बाँझ स्क्रू-टॉप प्लास्टिक ट्यूब में इकट्ठा करें.
10. सीरम का नमूना: वैक्यूम नकारात्मक दबाव रक्त संग्रह ट्यूब के साथ 5 मिलीलीटर रक्त नमूना एकत्र करें, इसे कमरे के तापमान पर खड़े रहने दें 30 मिनट, 1500 ~ 2000 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज 10 मिनट, सीरम को स्टेराइल स्क्रू-टॉप प्लास्टिक ट्यूब में इकट्ठा करें.
अन्य सामग्री: डिज़ाइन आवश्यकताओं के अनुसार एकत्र करें.
(5) नमूनों की पैकिंग
संग्रह के बाद, इसे जैव सुरक्षा माध्यमिक प्रयोगशाला के जैव सुरक्षा कैबिनेट में पैक किया जाएगा.
1. सभी नमूनों को उपयुक्त आकार के एक नमूना संग्रह ट्यूब में एक स्क्रू कैप और एक गैसकेट के साथ रखा जाना चाहिए जो ठंड के प्रति प्रतिरोधी हो, और कड़ा कर दिया. नमूना संख्या, प्रकार, नाम और नमूना लेने की तारीख कंटेनर के बाहर इंगित की गई है.
2. सीलबंद नमूनों को एक सीलबंद बैग में रखें, प्रत्येक बैग एक नमूने तक सीमित है. नमूना पैकेजिंग आवश्यकताओं को संबंधित मानकों को पूरा करना होगा “हवाई मार्ग से खतरनाक माल के सुरक्षित परिवहन के लिए तकनीकी नियम”.
3. बाहरी नमूनों के परिवहन के लिए, कक्षा ए या बी के नमूनों और संक्रामक पदार्थों के प्रकार के अनुसार तीन-परत पैकेजिंग की जाएगी.
(6) नमूनों का संरक्षण
वायरस अलगाव और न्यूक्लिक एसिड परीक्षण के लिए उपयोग किए जाने वाले नमूनों का जल्द से जल्द परीक्षण किया जाना चाहिए. ऐसे नमूने जिनका भीतर पता लगाया जा सकता है 24 घंटों को 4°C पर संग्रहित किया जा सकता है; ऐसे नमूने जिनका भीतर पता नहीं लगाया जा सकता 24 घंटों को -70°C या उससे कम तापमान पर संग्रहित किया जाना चाहिए (यदि नहीं- 70℃ पर संग्रहित, अस्थायी रूप से -20℃ पर रेफ्रिजरेटर में संग्रहित किया जाता है). सीरम को 4°C पर संग्रहित किया जा सकता है 3 दिन, और दीर्घकालिक भंडारण के लिए -20°C से नीचे. नमूनों को अलग से संरक्षित करने के लिए विशेष गोदाम या काउंटर स्थापित किए जाने चाहिए. नमूना परिवहन के दौरान बार-बार जमने और पिघलने से बचें.
(7) निरीक्षण हेतु नमूने प्रस्तुत किये गये
नमूने एकत्र करने के बाद यथाशीघ्र प्रयोगशाला में भेजे जाने चाहिए. यदि लंबी दूरी के परिवहन की आवश्यकता है, संरक्षण के लिए सूखी बर्फ और अन्य प्रशीतन विधियों का उपयोग करने की अनुशंसा की जाती है.

नकारात्मक न्यूक्लिक एसिड परीक्षण परिणाम नए कोरोनोवायरस संक्रमण से इंकार नहीं कर सकते. गलत नकारात्मक परिणाम देने वाले कारकों को बाहर करने की आवश्यकता है, शामिल: ख़राब नमूना गुणवत्ता, जैसे कि मुख-ग्रसनी से श्वसन नमूने, वगैरह।; नमूने बहुत जल्दी या बहुत देर से एकत्र किए गए; नमूनों का ठीक से भंडारण और परिवहन और प्रसंस्करण नहीं होना; स्वयं प्रौद्योगिकी के अस्तित्व के कारण, जैसे वायरल म्यूटेशन, पीसीआर निषेध, वगैरह.