신종 코로나바이러스 폐렴에 대한 실험실 테스트 기술 가이드

신종 코로나바이러스 폐렴에 대한 실험실 테스트 기술 가이드
2월에 21, 국가 보건위원회는 새로운 코로나 바이러스 폐렴 예방 및 통제 계획을 발표했습니다. (다섯 번째 판), 그리고 부록으로, 새로운 코로나 바이러스 감염 폐렴 실험실 테스트 기술 지침 발표 (다섯 번째 판).

신종 코로나바이러스 폐렴에 대한 실험실 테스트 기술 가이드

각급 질병통제부서 및 기타 관련 기관에서 신형 코로나바이러스 폐렴에 대한 실험실 테스트를 실시하도록 안내합니다., 이 기술 가이드는 특별히 제작되었습니다.
1. 검체 수집 및 처리
1. 비인두 면봉: 샘플러는 수집되는 사람의 머리를 부드럽게 지탱합니다., 한 손에는 면봉을 쥐고 있다, 면봉이 콧구멍에 붙어있다, 그리고 하부 비강 바닥을 따라 천천히 뒤로 깊어집니다.. 외상으로 인한 출혈을 피하기 위해 치열함. 면봉 끝이 비인두강 후벽에 닿았을 때, 일주일간 천천히 돌려주세요 (반사성 기침의 경우, 한동안 있어야 해), 그런 다음 천천히 면봉을 꺼내십시오., 면봉 헤드를 다음이 포함된 보존 용액에 담그십시오. 2 상하이, 루머 플랫폼 반박 3 ml의 바이러스 (등장성 식염수 사용도 가능, 조직 배양 용액 또는 인산염 완충 용액), 꼬리를 버리다, 그리고 캡을 꽉 조여주세요.
2. 인두 면봉: 채취한 사람은 먼저 생리식염수로 가글을 합니다., 샘플링 담당자는 면봉을 멸균된 일반 식염수에 넣어 적십니다. (항생제로 인한 알레르기를 피하기 위해 면봉을 바이러스 보존 용액에 넣는 것은 금지되어 있습니다), 수집된 사람의 머리가 약간 위로 기울어짐, 입이 넓어졌다, ~와 함께 “아” 소리, 인두 편도를 양쪽에 노출시킵니다, 혀 밑 부분의 면봉, 그리고 피험자의 양쪽 인두 편도선을 앞뒤로 조금 세게 닦아주는 것입니다. 3 타임스, 그러면 적어도 3 인두 뒷벽에 두 번째, 면봉 헤드를 튜브에 담그십시오. 2 상하이, 루머 플랫폼 반박 3 ml의 바이러스 보존 용액 (등장성 식염수 용액, 조직 배양액이나 인산염 완충액도 사용할 수 있습니다.), 꼬리를 버리다, 그리고 캡을 꽉 조여주세요. 인두 면봉 표본은 비인두 면봉 표본과 동일한 튜브에 넣을 수도 있습니다.. 3. 비인두 추출물 또는 호흡기 추출물: 비인두에서 점액을 추출하거나 기관에서 기도 분비물을 추출하려면 음압 펌프에 연결된 수집기를 사용하십시오.. 콜렉터 헤드를 비강이나 기관에 삽입합니다., 음압 켜 줘, 컬렉터 헤드를 회전시키고 천천히 종료하십시오., 추출된 점액을 수집, 3ml의 샘플링 액체로 수집기를 한 번 헹구십시오. (소아용 카테터를 사용하여 50ml 주사기에 연결할 수도 있습니다.).
4. 깊은 가래: 환자는 깊은 기침 후 3ml의 검체 용액이 들어 있는 50ml 나사 플라스틱 튜브에 기침된 객담을 수집해야 합니다.. 검체액에 객담이 채취되지 않는 경우, 검사 전 검체액 2~3ml를 첨가하거나 동량의 가래소화액을 첨가합니다..
객담 소화액 저장액 제제:
사용 전, 원액을 희석하여 100 ml(탈이온수 포함). 인산염 완충액 함유 1 g/L 단백질분해효소 K는 동일한 양의 가래로 액화될 수도 있습니다..
5. 기관지 세척액: 수집기 헤드를 기관에 삽입합니다. (깊이 약 30cm) 콧구멍이나 기관 소켓에서, 식염수 5ml를 주입한다, 음압 켜 줘, 컬렉터 헤드를 회전시키고 천천히 빼냅니다.. 추출된 점액을 채취하고 채취액으로 수집기를 한 번 헹구십시오. (수집물을 교체하기 위해 소아용 카테터를 사용하여 50ml 주사기에 연결할 수도 있습니다.).
6. 폐포 세척액: 국소마취 후, 광섬유 기관지경을 입이나 코를 통해 인두를 통해 삽입하고 오른쪽 중엽 분지 또는 왼쪽 폐 혀 부분에 삽입합니다., 기관지 입구에 팁을 맞춥니다., 기관 생검 구멍을 통해 천천히 멸균 생리를 추가합니다. 소금물, 30-50매번 ml, 총량은 100-250ml입니다, 300ml를 넘지 않아야 한다.
7. 대변 ​​표본: 검체처리액 1ml를 취한다., 대두 표본 크기를 선택하여 튜브에 추가합니다., 부드럽게 빨아 3-5 타임스, 실온에 잠시 놓아두세요 10 분, 8000rpm으로 원심분리기를 5 분, 검출을 위해 상등액을 빨아들입니다..
대변 ​​검체 처리액을 직접 준비할 수 있습니다.: 1.211 g 트리스, 8.5 g 염화나트륨, 1.1 g 무수 염화칼슘 또는 1.47 g 결정수를 함유한 염화칼슘, 에 용해 800 ml 탈이온수, 그리고 pH에 맞춰 7.5 진한 염산으로 , 탈이온수로 최대 1000ml까지 만드세요.
HANK'S 용액이나 기타 등장성 식염수를 사용하여 대변 검체를 용해시켜 대변 현탁액을 제조할 수도 있습니다., 조직 배양 용액 또는 인산염 완충액. 환자에게 설사 증상이 있는 경우, 떠나다 3 상하이, 루머 플랫폼 반박 5 ml의 대변 샘플, 부드럽게 피펫팅하고 섞는다, 원심분리기 8000 rpm 5 분, 그리고 상층액을 뽑아서 사용하세요.
8. 항문 면봉: 멸균된 면봉을 항문에 3~5cm 정도 천천히 삽입합니다., 그런 다음 가볍게 돌려서 빼내세요., 즉시 바이러스 보존액 3~5ml가 들어있는 15ml 외부 스크류 캡 샘플링 튜브에 넣습니다., 꼬리를 버리다, 그리고 튜브 커버를 조여주세요.
9. 혈액 표본: EDTA 항응고제가 함유된 진공 혈관을 사용하여 5ml의 혈액 검체를 채취하는 것이 좋습니다.. 선택한 핵산 추출 시약의 종류에 따라 전혈 또는 혈장을 이용한 핵산 추출 결정. 플라즈마를 분리하려면, 전혈을 1500-2000rpm으로 원심분리합니다. 10 몇 분 후 멸균 나사형 플라스틱 튜브에 상층액을 수집합니다..
10. 혈청 샘플: 진공 음압 채혈관으로 혈액 검체 5ml를 채취합니다., 실온에 방치해 둔다 30 분, 1500~2000rpm의 원심분리기 10 분, 멸균 나사형 플라스틱 튜브에 혈청을 수집합니다..
기타 재료: 설계 요구 사항에 따라 수집.
(5) 검체 포장
컬렉션 후, 생물안전 2차 연구실의 생물안전 캐비닛에 포장됩니다..
1. 모든 검체는 나사형 캡과 얼지 않는 개스킷이 있는 적절한 크기의 검체 수집 튜브에 넣어야 합니다., 그리고 조여졌다. 샘플 번호, 유형, 용기 외부에 명칭과 채취일자가 표시되어 있습니다..
2. 밀봉된 검체를 밀봉백에 담는다, 각 가방은 하나의 표본으로 제한됩니다.. 샘플 포장 요구 사항은 해당 표준을 충족해야 합니다. “위험물의 안전한 항공 운송을 위한 기술 규칙”.
3. 외부 검체 운반용, A급 또는 B급 검체 및 감염성 물질의 종류에 따라 3중 포장을 하여야 한다..
(6) 표본의 보존
바이러스 분리 및 핵산 검사에 사용되는 검체는 가능한 한 빨리 검사해야 합니다.. 내에서 검출할 수 있는 시료 24 시간은 4 ° C에서 저장 될 수 있습니다; 내에서 검출할 수 없는 검체 24 시간은 -70 ° C 이하로 보관해야합니다 (그렇지 않다면- 70℃에서 보관, -20℃ 냉장고에 임시보관). 혈청은 4°C에서 보관할 수 있습니다. 3 날, 장기 보관 시 -20°C 이하. 표본을 별도로 보관하기 위해서는 별도의 창고나 카운터를 설치해야 합니다.. 검체 운반 중 반복적인 동결과 해동을 피하십시오..
(7) 검사를 위해 제출된 표본
검체는 수집 후 가능한 한 빨리 실험실로 보내야 합니다.. 장거리 운송이 필요한 경우, 보존을 위해 드라이 아이스 및 기타 냉장 방법을 사용하는 것이 좋습니다..

핵산검사 음성 결과, 신종 코로나바이러스 감염 가능성 배제할 수 없어. 위음성을 유발할 수 있는 요인을 배제할 필요가 있음, 포함: 샘플 품질이 좋지 않음, 구인두의 호흡기 검체 등, 등.; 너무 일찍 또는 너무 늦게 수집된 샘플; 적절하게 보관 및 운송되지 않은 샘플 처리; 기술 자체의 존재 이유, 바이러스 돌연변이와 같은, PCR 억제, 등.